pET-50b(+)載體基本信息
| 別名: | pET50b, pET 50b | 
|---|---|
| 質粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達 | 
| 表達水平: | 高 | 
| 克隆方法: | 多克隆位點,限制性內切酶 | 
| 載體大小: | 6733 bp | 
| 5' 測序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' | 
| 3' 測序引物及序列: | T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' | 
| 載體標簽: | N-Nus, N-His, N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin | 
| 載體抗性: | 卡那 | 
| 備注: | 
								和pET47系列載體一樣,但是多出了一個N端Nus標簽;載體含有HRV 3C蛋白酶切位點,可以在低溫下直接將多余的融合表達標簽切除。
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| 產品目錄號: | 71464-3 | 
| 穩定性: | 瞬時表達 | 
| 組成型: | 組成型 | 
| 病毒/非病毒: | 非病毒 | 
				

 
			
				pET50b載體攜帶有N端的Nus標簽和His純化標簽,緊跟著這些標簽的有一個HRV3C蛋白酶切位點。這個HRV3C蛋白酶切位點能夠特異性的高效切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列,酶活力在低溫下很強。pET-50b(+)載體上還含有一個可選擇的C端Thrombin蛋白酶切位點和S標簽序列。
載體的單一的多克隆位點見上面的環狀質粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質粒的編碼規矩進行編碼的,所以T7蛋白表達區在質粒圖譜上面是反向的。
T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。
