pET-48b(+)載體基本信息
| 別名: | pET48b, pET 48b | 
|---|---|
| 質粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達 | 
| 表達水平: | 高 | 
| 克隆方法: | 多克隆位點,限制性內切酶 | 
| 載體大小: | 5605 bp | 
| 5' 測序引物序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; Trx-F: 5'-TTCCTCGACGCTAACCTG-3' | 
| 3' 測序引物序列: | T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' | 
| 載體標簽: | N-Trx, N-His,N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin | 
| 載體抗性: | 卡那 | 
| 表達宿主菌: | Rosetta-gami2 、 Rosetta-gami2(DE3) | 
| 備注: | 
								與pET47系列載體相同,但多了Trx標簽。; 含有HRV 3C蛋白酶切位點,可以在低溫下將融合標簽切除。含有C端Thrombin蛋白酶切位點。
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| 產品目錄號: | 71462-3 | 
| 穩(wěn)定性: | 瞬時表達 | 
| 組成型: | 組成型 | 
| 病毒/非病毒: | 非病毒 | 
				

 
			
				pET-48b載體含有N端Trx和His標簽,在標簽后面緊跟著的是HRV 3C蛋白酶切位點。HRV 3C蛋白酶能夠高特異性的識別LEVLFQ↓GP蛋白序列,能夠在低溫下高效切割掉融合標簽序列。pET-48b載體還含有一個可選擇的C端Thrombin蛋白酶切位點,緊接著位點后是S標簽。
pET48b載體的單一的多克隆位點見上面的環(huán)狀質粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質粒的編碼規(guī)矩進行編碼的,所以T7蛋白表達區(qū)在質粒圖譜上面是反向的。
T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。
載體的單鏈測序應該使用S 18引物(Cat. No. 71262-3)。
